注：

● 蛋白提取液： 含多种有效成分，可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。

● 蛋白酶抑制剂混合物：包含7种独立的蛋白酶抑制剂，AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin

A、Bestatin、E-64、EDTA。

注意：

1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。

2、如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以全部加入提取液。

储存条件：

蛋白提取液，磷酸酶抑制剂2-8℃保存；

蛋白酶抑制剂-20℃保存。

有效期：

一年。

注意事项：

● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品简介：

????植物核蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织，如叶片、根、种子等植物组织中提取核蛋白。提取过程简单方便，可在1 小时内完成。

制备的核蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

产品特点：

1、使用方便。

2、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。

3、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

4、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

5、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。

该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管

● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：

?? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

?? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

?? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

?? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1. 提取液制备：每500ul 预冷的核蛋白提取液A 和200ul 提取液B 中分别加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的 200mg 植物组织样本剪碎，采用以下一种方法处理：

A、加入 500ul 提取液A 后用匀浆机/匀浆器匀浆。

B、置于研钵中用液氮研磨，研磨后加入 500μl 冷的提取液 A。

C、加入 500ul 提取液A 直接置冰上研磨。

3. 高速涡旋振荡 5 秒，然后在4℃，100×g 力条件下离心1 分钟。

4. 收集上清，弃沉淀。

5. 将上清在 4℃，800×g 力条件下离心1 分钟。

6. 弃上清，收集沉淀。

7. 在沉淀中加入 200μl 冷的提取液B，高速涡旋振荡15 秒。

8. 置冰上 40 分钟，每隔10 分钟高速涡旋振荡15 秒。

9. 在 4℃，16000×g 条件下离心10 分钟。

10. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。

11. 将上述蛋白提取物定量①后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验②。

注：

① 建议用BCA 法进行蛋白定量。

② 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。