用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有多糖(Polysaccharide,PS)污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前没有十分有效的方法去除这一污染。我公司开发的非酶法PS清除剂能够比较好的解决这一问题。
1. 高效,能有效地去除总RNA中的PS污染,使RNA溶液不再粘稠。
2. 不含RNase污染,RNA分子完整性不会受到任何影响。
3. 快速,全部操作在样品管中完成,只需要二十多分钟。
4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存。
低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将十分粘稠的总RNA样品用RNase-free水稀释到100-500 uL左右,加入等体积的65℃预热10分钟后的PS Erasol,振荡器上充分振荡1分钟。
2. 加入等体积的氯仿,振荡器上充分振荡1分钟。
3. 12000-15000 g离心2分钟,转移上清到一新的离心管中,交界处将有白膜样的多糖沉淀。
4. 加入0.1倍体积的3 M NaOAc (pH5.2)和两倍体积的无水乙醇,混匀后12000-15000 g离心10-20分钟。小心弃上清。
5. 加入1 mL 75%乙醇, 振荡器上短暂振荡后12000-15000 g离心2分钟,小心弃上清。
6. 短暂离心,用移液枪小心吸去残留液体后,加入适量RNase-free水或天泽基因的具有灭活残留RNase的液相RNase Erasol。立即使用或-80℃保存。