注:

● 蛋白提取液: 含多种有效成分,可以充分释放浆蛋白、核蛋白和膜蛋白,又可结合释出的蛋白防

止沉淀。

● 蛋白酶抑制剂混合物:包含6种独立的蛋白酶抑制剂,AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin

A、Bestatin、E-64。

注意:

1、 蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。

2、 如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以全部加入提取液。

储存条件:

蛋白酶抑制剂-20℃保存;蛋白提取液、蛋白稳定剂2-8℃保存。

有效期:

一年。

注意事项:

● 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。

● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品简介:

本试剂盒提供全套试剂,适用于从各种植物细胞、组织样本中提取总蛋白。提取过程简单方便。本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等蛋白研究。本试剂盒提取的蛋白不可用于2D 电泳。如下游实验需要用于2D 电泳、等电聚焦电泳,请使用其他货号的试剂盒。

本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。

产品特点:

1、 使用方便,提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。

2、 将蛋白提取的时间缩短至30 分钟-1 小时。

3、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。

4、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。

5、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6 种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。

该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管

● 涡旋振荡器 ● 冰箱,冰盒

使用方法:

使用注意事项:

? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。

? 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。

? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

植物组织样本:

1、 提取液准备:每500ul 冷的提取液中加入2ul 蛋白稳定剂和2ul 蛋白酶抑制剂,

混匀后置冰上备用。

2、 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200mg 鲜嫩植物组织样本剪碎,采用以下一种方法处理:

i. 加入500ul 提取液A 后用匀浆机/匀浆器匀浆。

ii. 置于研钵中用液氮研磨,研磨后加入500μl 冷的提取液 A。

iii. 加入500ul 提取液A 直接置冰上研磨。

3、 研磨后吸入一个预冷的干净离心管中,置混合器或振荡器振荡30 分钟-1 小时。

4、 将裂解液吸入离心柱内柱,套上套管,在4℃,8000-10000Xg 条件下离心3-5分钟。

5、 收集套管内液体即得到植物总蛋白样本。

上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

细胞样本:

1、 提取液准备:每500ul 冷的提取液中加入2ul 蛋白稳定剂和2ul 蛋白酶抑制剂,混匀后置冰上备用。

2、 细胞用PBS 洗涤2 次。

3、 加入细胞体积5-10 倍体积的蛋白提取液,振荡30 分钟-1 小时。

4、 将裂解液吸入离心柱内柱,套上套管,在4℃,8000-10000Xg 条件下离心3-5分钟。

5、 收集套管内液体即得到植物总蛋白样本。

上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

冻存样本:

1、 冻存组织样本参照上述组织样本步骤操作。

2、 冻存细胞样本中直接加入5-10 倍体积的蛋白提取液,振荡30 分钟。

3、 将裂解液吸入离心柱内柱,套上套管,在4℃,8000-10000Xg 条件下离心3-5分钟。

4、 收集套管内液体即得到植物总蛋白样本。

上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。