储存条件：

蛋白酶抑制剂-20℃保存；

蛋白提取液2-8℃保存；

膜蛋白稀释液室温保存。

有效期：

一年。

注意事项：

● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品简介：

叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器，光合作用就是在叶绿体中进行的, 由于具有这一重要功能，所以叶绿体一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器。跨膜蛋白承担各种生物功能，在生物的各种发展过程中扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。

????叶绿体膜蛋白提取试剂盒用简便快速的方法可以从各种植物样本中提取叶绿体膜蛋白，提取过程简单方便，可在一小时内提取得到高质量的叶绿体膜蛋白。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的膜蛋白具有天然活性，提取的蛋白可用于Western Blotting、免疫共沉淀、酶活性测定等各种下游蛋白研究实验。

产品特点：

1、使用方便。

2、将蛋白提取的时间缩短至 1 小时。

3、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

4、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

5、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。

该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管

● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：

?? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

?? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

1. 取新鲜植物样本叶片，洗净擦干后去除叶梗和粗脉。

2. 每 2g 样本加入4ml 提取液A。

3. 用研钵快速研磨 30-60 秒，或者用组织搅碎机高速匀浆1 分钟。

4. 将匀浆用 3 层纱布或者400 目滤网过滤。

5. 将滤液 200g 力（约1000RPM，不同离心机不一样，以实际为准） 离心1 分钟。将上清移入另一干净离心管。

6. 将上清 1000g 力（约3000RPM）离心5 分钟。

7. 弃上清，收集沉淀。

8. 在沉淀中加入 500ul 抽提液B 和2ul 蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后在冰上静置1-2 小时，中间每隔15-20 分钟高速涡旋振荡15 秒。

9. 将提取液在 4℃，12000×g 条件下离心5 分钟，取上清。

10. 在上清中加入 5ul 抽提液C，充分混匀。

11. 在 37℃水浴10 分钟。

12. 在 37℃ 1000g 离心3 分钟。

13. 此时溶液分为两层，移除上层以及界面层，保留下层溶液，大约 30-50ul。

14. 用 50-150μl 冰冷的膜蛋白稀释液稀释下层溶液，即得叶绿体膜蛋白。

15. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或调整相应的浓度后直接用于下游实验。