储存条件：

蛋白提取液A 室温保存；

蛋白提取液 B 和蛋白酶抑制剂-20℃保存。

有效期：

一年。

注意事项：

● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品简介：

细菌总蛋白提取试剂盒（双向电泳用）可以从各种原核细菌样本中提取总蛋白，提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。

提取的蛋白用于双向电泳。如需要用于基因检测、SDS-PAGE 电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验的试剂盒，请联系本公司选购其他货号的试剂盒。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管

● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：

.. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

?? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

?? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

?? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

?? 本试剂盒提取的蛋白样本可直接用于 2D 电泳，也可根据需要进行TCA/丙酮沉淀处理后使用。

详细步骤可联系本公司索取。

?? 更多蛋白提取常见问题分析等资料可以联系本公司索取。

1. 裂解液的准备：根据所需要提取的样本量，每 500ul 蛋白提取液中A 加入5ul试剂B 和2ul 蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。

2. 在 4℃ 12000RPM 条件下将菌液离心5min，弃上清，尽量吸干剩余液体，收集菌体，用PBS 洗菌体2 次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。

3. 按每 20mg 湿重菌体样本加入500ul 裂解液，吹打混匀，冰上放置30 分钟，间隔一段时间振荡。（选做步骤：300w，10s 超声/10s 间隔条件下冰浴超声至菌液变清。若不做，请延长裂解液作用时间至2 小时。）

4. 在 4℃ 12000RPM 条件下将提取液离心5 分钟。

5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到细菌总蛋白。

6. 将上述蛋白提取物定量①后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

注：

① 建议用 Bradford 法或Lowry 法进行蛋白定量。