产品特点:
全长的 Bst DNA 聚合酶来源于 Bacillus stearothermophilus,它具有5′→3′ 聚合酶活性和双链特异的5′→3′ 核酸外切酶活性,但缺失3′→5′ 核酸外切酶活性。它具有下列特性:
1. DNA 等温扩增。
2. 引物延伸。
3. 80℃ 20分钟即可失活。
4. 建议反应温度不要超过70℃,不能用于热循环测序或PCR。
低温运输,-20℃保存、有效期一年。长期贮存需补加100 μg/mL BSA 或 0.1% Triton X-100。
1×反应Buffer的组成:
20 mM Tris-HCl (pH 8.8 @ 25℃), 10 mM KCl, 10 mM (NH4)2SO4, 2 mM MgSO4, 0.1% Triton X-100。
活性定义及检测条件
1 U指 65℃条件下,30 分钟内使 10 nmoL的 dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。活性检测条件为:50 mM KCl, 20 mM Tris-HCl (pH 8.8),10 mM MgCl2, 30 nM M13mp18 ssDNA, 70 nM M13测序引物 (-47) 24 mer, 200 μM dATP, 200 μM dCTP,200 μM dGTP, 100 μM [3H] dTTP, 100 μg/mL BSA 和酶,65℃温育。
贮存条件
50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.1% Triton X-100和50%甘油,贮存于-20℃。