注：

● 核蛋白提取液： 含多种有效成分，可以充分释放核蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。提取液中已含磷酸酶抑制剂混合物。

● 蛋白酶抑制剂混合物：包含7种独立的蛋白酶抑制剂，AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin

A、Bestatin、E-64、EDTA。

注意：

1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。

2、如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以全部加入提取液。

储存条件：

蛋白酶抑制剂-20℃保存；

蛋白提取液2-8℃保存。

有效期：

一年。

注意事项：

● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品简介：

????真菌核蛋白提取试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产核蛋白提取试剂盒。真菌核蛋白提取试剂盒可以从各种大型真菌（蕈菌）中提取核蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及核蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性，可用于各种下游实验。

产品特点：

1、使用方便。

2、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。

3、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

4、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

5、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。

该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管

● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：

?? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

?? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

?? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

?? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

?? 更多蛋白提取常见问题分析等资料可以联系本公司索取。

使用方法：

1、每500ul抽提液A中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，200ul抽提液B中加入1ul蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。

2、取200mg真菌①组织样本剪碎。

3、加入500ul提取液A，混匀后于一个预冷的干净离心管中在冰上静置2-3小时。中间间隔振荡。

4、将提取液在低温下12000×g离心5分钟，弃上清。

5、在沉淀中加入 200μl 冷的提取液B，高速涡旋振荡15 秒。

6、置冰上 40 分钟，每隔10 分钟高速涡旋振荡15 秒。

7、在 4℃，16000×g 条件下离心10 分钟。

8、快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。

9、将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。

注：

① 组织数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。

② 建议用BCA 法进行蛋白定量。

③ 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。