注：

● 蛋白提取液： 含多种有效成分，可以充分蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。提取液中已含磷酸酶抑制剂混合物。

● 蛋白酶抑制剂混合物：包含7种独立的蛋白酶抑制剂，AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin

A、Bestatin、E-64、EDTA。

注意：

1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。

2、如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以全部加入提取液。

储存条件：

蛋白酶抑制剂-20℃保存； 蛋白提取液室温保存。

有效期：

一年。

注意事项：

● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品简介：

我司真菌蛋白提取试剂盒适用于从各种大型真菌（蕈菌）类样本中提取总蛋白。试剂盒组分针对厚细胞壁样本进行优化，提取过程简单方便，可在1 小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。

产品特点：

1、使用方便。

2、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

3、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

4、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。

该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管

● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：

?? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

?? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

?? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

?? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

?? Western 实验内参可以选用beta-actin、GAPDH、Tubulin。

?? 更多蛋白提取常见问题分析等资料可以联系本公司索取。

1. 提取液制备：每 500ul 冷的真菌蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物，4ul 蛋白稳定剂，混匀后置冰上备用。

2. 取 100mg 组织样本剪碎①，置于研钵中用液氮研磨。（没有液氮研磨条件也可直接加入提取液后置冰上研磨即可）

3. 研磨后加入 500ul 真菌蛋白提取液。

4. 混匀后，在 4℃条件下振荡20-30 分钟。

5. 在 4℃，14000rpm 条件下离心10 分钟。

6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到真菌总蛋白。

7. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。

注：

①用液氮研磨的方法更佳

② 建议用 BCA 法进行蛋白定量。

③ 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。