cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口，再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链

本产品具有下列特点：

1. 即开即用，含有合成cDNA第二链的所有试剂。

2. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。

低温运输，-20℃保存，有效期一年。

一、合成cDNA条链

本试剂盒不提供cDNA链合成试剂，用户需自备相关试剂合成cDNA链。

二、合成cDNA第二链

1. 在冰浴上向已经完成合成cDNA条链的反应体系中依次加入下表试剂

注：如果不需要将双链cDNA平末端化，则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。

2. 电泳5 μL检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片，则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常，需查找原因后再继续。

3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等实验。