用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。????????开发的非酶法DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有操作快速,稳定性好和性价比高等诸多优点,完全可以替代价格昂贵的RNase-free DNase。

1. 高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降上百倍(根据PCR检测)而RNA分子完整性不会受到任何影响。

2. 不含RNase污染,因为本产品为非酶产品, 所用溶液又经过????????的液相RNase清除剂的处理(能不可逆地灭活RNase);而在制备RNase-free DNase时,为避免DNase失活,处理条件往往比较温和,所以终产品中往往残留有RNase污染。

3. 快速,全部操作在样品管中完成,只需要十多分钟,不需要37℃保温和酚/氯仿抽提;而使用RNase-free DNase时,需要上述处理,增加了污染RNase的可能性。

4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。

5. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。

6. 只能回收长度在200nt以上的RNA(DNA Erasol-2可以回收长度在200nt以上和以下的RNA)。


常温运输、4℃保存,有效期一年。


使用方法:

1. 将总RNA溶液与DNA Erasol按3:1的比例混合(即300 uL RNA溶液需加100uL DNA Erasol)。

2. 12000-15000 g室温离心10分钟后小心弃上清,

3. 在沉淀中加入1 mL 自备70%乙醇,震荡半分钟。

4. 12000-15000 g室温离心5分钟后小心弃上清。

5. 将离心管短暂快速离心,小心吸弃余液。

6. 加入适量RNase-free水或液相RNase清除剂溶解RNA沉淀,立即使用或放-80℃长期保存。

注意:本产品只能回收长度在200nt以上的RNA,RNA样品中含有小RNA,将会丢失。