储存条件：

蛋白酶抑制剂-20℃保存；

蛋白提取液A 2-8℃保存，蛋白提取液B、C 室温保存。

有效期：

一年。

注意事项：

● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品简介：

????植物组蛋白提取试剂盒提供了一种简单而应用广泛的方法以及相应的试剂提取组蛋白。适用于从各种植物细胞、组织样本中提取组蛋白。提取过程简单方便。组蛋白提取产物的产量大约0.2-0.4 mg 每107 个细胞或100 mg 组织，不同的细胞和组织中，产量差异很大。

提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、组蛋白修饰实验比如乙酰化、甲基化、sumoylation 等下游蛋白研究。

产品特点：

1、 使用方便，不需经过反复冻融、超声破碎等前处理。

2、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

3、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

4、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。

该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管

● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：

1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

植物组织组蛋白提取：

1. 提取液制备：每500ul 蛋白提取液A 中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物混匀后置冰上备用。

2. 取100mg 植物组织样本用剪刀尽可能剪碎，加入蛋白提取液A，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。

3. 将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中，在4℃，16000g 条件下离心15 分钟，弃上清。

4. 沉淀中加入100ul 组蛋白提取液B。

5. 用200ul 枪头反复吹打混匀或充分涡旋振荡混匀，置4℃冰箱过夜存放。

6. 16000g 条件下离心10 分钟，收集上清。

7. 在上清中加入25ul 试剂C 充分混匀。

8. 加入上样缓冲液混匀后煮沸，分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

植物细胞组蛋白提取：

1. 提取液制备：每500ul 蛋白提取液A 中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物混匀后置冰上备用。

2. 收集5-10×106 个细胞①，在4℃，1000g 条件下离心5-10 分钟，吸干上清，收集细胞。

3. 用冷PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

4. 每5-10×106 个细胞中加入500ul 蛋白提取液A，混匀后，在4℃条件下轻轻振荡10 分钟。

5. 在4℃，16000g 条件下离心15 分钟，弃上清。

6. 沉淀中加入100ul 组蛋白提取液B。

7. 用200ul 枪头反复吹打混匀或充分涡旋振荡混匀。

8. 置4℃冰箱过夜存放。

9. 16000g 条件下离心10 分钟，收集上清。

10. 在上清中加入25ul 试剂C 充分混匀。

11. 加入上样缓冲液混匀后煮沸，分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验②。

注：

① 细胞数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。

② 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。