银染是目前灵敏的非同位素蛋白质和核酸染色技术,对银染后的条带进行原位酶切(in-gel digestion)和后续MS分析是蛋白组学研究的重要手段。大量研究表明如果预先对银染条带进行去除银粒子的处理,则原位酶切更加有效,MS灵敏度更高。目前常用的脱银粒子清除方法(如铁氰酸钾/硫代硫酸钠法、硫酸铜/硫代硫酸钠法)的主要缺点是引入的金属离子会影响后续反应、有的成分还有毒性(如铁氰酸钾)、工作液极不稳定。为克服这些缺点,本公司开发了无毒环保的新型银粒子清除剂,它具有下列特点:
1. 高效,5分钟处理即可清除PAGE胶中银染留下的银粒子。
2. 成分不含金属离子,跟原位酶切和质谱分析(包括MALDI-TOEMS)等后续反应高度兼容,脱银后PAGE胶还可以再次银染或考染。
3. 成分无毒环保,保障研究人员和环境的安全。
4. 既可用于蛋白质银染后的脱银,也可用于核酸银染后的脱银。
5. 即开即用,使用非常方便,不需要配制各种溶液。
常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
1. 银染后,切下含所需蛋白条带的PAGE胶条用自备的去离子水摇晃浸泡2次,每次5分钟以去除电泳缓冲液。注意:不要使用整块PAGE胶。
2. 用干净镊子将胶条转移到5-10 mL的容器中(如5 mL的塑料管或10 mL的细菌培养管),加入1 mL溶液A,摇晃5分钟。
3. 直接在上步的管子中再加入3.3 mL溶液B,继续摇晃直到染色脱去(一般需要约20分钟)。
4. 取出脱色后的胶条,在去离子水中摇晃浸泡二次,每次5分钟。
5. 胶条可以直接用于后续的再染色或质谱分析(需要先甲酸酸化和脱水处理)。