Shrimp Alkaline Phosphatase(SAP)虾碱性磷酸酶与大肠杆菌来源的碱性磷酸酶同样,催化所有磷酸单酯的水解,不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解,也能催化ATP 等焦磷酸键水解。但该酶与大肠杆菌来源的BAP 以及小牛肠来源的CIAP 不同,通过65℃,15 分钟的热处理,可使酶完全不可逆失活。

本产品具有下列用途:

1. 去除DNA 片段的5 ’ - 末端的磷酸基。防止线状DNA 的自身环化(Self-Ligation)。

2. 除去PCR 反应后残存的dNTP。PCR 产物进行测序时,在反应体系中如果有多余的Primer 和dNTP,将影响测序反应的正常进行。使用Exonuclease I分解残存的Primer;用SAP 处理可降解多余的dNTP,之后不需要对PCR产物进行精制,立即可以进行测序反应。

活性单位定义:

在37℃、pH9.8 的条件下,1 分钟内水解对硝基苯磷酸盐(p-nitrophenol phosphate)生成1 μmol 的对硝基苯酚(p-nitrophenol)所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

纯度

1. 5 U 的本酶和1 μg 的λDNA-Hind III 片段在37℃、pH7.5 的条件下反应1 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化。

2. 5 U 的本酶和1 μg 的16S,23S rRNA 在37℃、pH7.5 的条件下反应1 小时,RNA 的电泳谱带不发生变化。

Buffer 成分:

储存Buffer: 25 mM Tris-HCl, pH7.6(4℃);5 mM MgCl2;50% Glycerol。

缓冲液Buffer,10×:500 mM Tris- HCl, pH9.0(37℃);50 mM MgCl2。

低温运输,-20℃保存,有效期一年。